Toxicité comparative des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG

Résumé

Nous présentons une étude comparative de la toxicité de nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de polyéthylène glycol (PEG). Les nanoparticules ont été préparées par méthode hydrothermale, les nanosphères par technique solvothermale. La surface des nanomatériaux a été modifiée avec succès par le PEG. Pour investiguer la morphologie, la diffraction des rayons X (DRX), la spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR), la spectroscopie Raman, l'analyse thermogravimétrique (ATG) et les techniques de microscopie électronique ont été employées. Les analyses structurales confirment la formation de nanoparticules polycristallines de ferrite de cobalt de 20–25 nm et de nanosphères de 80–100 nm. Des souris Kunming SPF (femelles, 6–8 semaines) ont été utilisées pour étudier la toxicité induite par ces nanomatériaux dans différents organes. Des études de biodistribution, indices biochimiques, évaluations histopathologiques, facteurs inflammatoires, niveaux d'oxydation/antioxydation et tests de cytotoxicité ont été réalisés. Les nanosphères de ferrite de cobalt se sont révélées plus toxiques que les nanoparticules, et la curcumine s'est avérée un bon agent de guérison pour la toxicité induite par ces nanomatériaux enrobés de PEG chez la souris.

Introduction

Ces dernières années, les nanomatériaux magnétiques ont suscité un immense intérêt en recherche fondamentale et applications technologiques. Ces applications incluent, sans s'y limiter : vecteurs d'administration de médicaments [1,2,3], imagerie par résonance magnétique (IRM) [4,5,6], hyperthermie [7,8,9], biosenseurs [10], séparation cellulaire [11], séparation de protéines [11,12], magnétofection génique [13,14,15], pollution environnementale et remédiation [16,17]. La ferrite de cobalt, comme matériau magnétique dur, est utilisée comme agent de contraste pour l'IRM, administration ciblée de médicaments et médiateur de chauffage en hyperthermie [18,19,20,21,22,23]. Bien que utilisée en applications biomédicales, elle présente des restrictions : toxicité élevée due à la libération importante de cobalt en solution, agrégation en solution, et faible accessibilité de surface avec les tensioactifs. Ce problème a été surmonté par modification de surface avec des matériaux biocompatibles, non toxiques, stables et dispersants dans l'eau [24,25,26,27,28]. De plus, la fabrication de ferrite de cobalt est facile et rentable avec compositions, formes et tailles adaptées. Diverses techniques de synthèse de ferrite de cobalt nanosize existent : mécanochimique [29], sonochimique [30], coprécipitation [31,32], micro-émulsion [33], et autres [34,35,36,37,38]. Une méthode mono-étape éco-responsable a été adoptée pour fabriquer des nanoclusters de cuivre fluorescents sur mesure utilisant la curcumine comme matrice [39]. Un inconvénient majeur de la plupart de ces techniques est la faible cristallinité du matériau préparé, entraînant une détérioration significative des caractéristiques magnétiques. À cet égard, les techniques hydrothermale [40] et solvothermale [41] sont les plus efficaces pour synthétiser la ferrite de cobalt avec morphologies et cristallinités contrôlées.

Dans la littérature, divers nanomatériaux comme les nanoparticules d'argent (Ag NP) ont été rapportés pour traitement antimicrobien et maladies infectieuses associées, ainsi que comme nanovecteurs pour administration de médicaments [42]. Dans un article de revue, les ferrates ont été rapportées pour l'élimination d'espèces chimiques et biologiques diverses des eaux usées [43]. Dans l'application biomédicale des nanomatériaux de ferrite de cobalt, le problème principal est l'accumulation dans les organes, résultant en toxicité nécessitant l'élimination urgente des nanomatériaux collectés et la guérison des dommages induits. Plusieurs chercheurs ont étudié les médicaments anti-inflammatoires qui peuvent réduire la toxicité induite par les nanomatériaux [44,45]. La curcumine, aux caractéristiques antioxydantes, antimutagènes, antitumorales et anticancéreuses, peut être utilisée comme agent de guérison pour la toxicité induite par les nanomatériaux de ferrite de cobalt [46,47,48]. Elle a la capacité d'être utilisée comme bloqueur de TNF in vitro et in vivo en se liant directement au TNF [49].

L'objectif de ce travail était de fabriquer en laboratoire des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG avec morphologies contrôlées. Différentes doses ont été injectées par voie intraveineuse chez la souris et analyses sanguines, biodistribution, coloration HE et viabilité cellulaire ont été effectuées pour évaluer la toxicité. La comparaison de la toxicité des nanoparticules et nanosphères a été faite et la curcumine utilisée comme agent de guérison pour la toxicité induite par les nanosphères. Il a été montré que les nanosphères sont plus toxiques que les nanoparticules en raison de leur surface élargie, les rendant plus toxiques et réactives. À notre connaissance, c'est la première étude détaillée de ce type jamais réalisée.

Matériaux et méthodes

Préparation des nanomatériaux

Pour les nanoparticules de ferrite de cobalt enrobées de PEG, nous avons adopté la technique hydrothermale [40, 47]. Des solutions de chlorure de cobalt (0,2 M) et nitrate ferrique (0,4 M) ont été préparées séparément dans 25 mL d'eau déionisée (DI) chacune, puis mélangées avec 25 mL de solutions aqueuses de PEG (2,5 mM) et d'hydroxyde de sodium (3 M). Le mélange a été agité 20 min et versé dans une autoclave en acier inoxydable (AI), chauffée à 180 °C pendant 6 h. Après refroidissement à température ambiante, la solution a été lavée 2–3 fois à l'eau DI et à l'éthanol pour éliminer les impuretés. Le mélange a été séché à ~80 °C toute la nuit au four puis broyé en poudre fine pour obtenir les nanoparticules de ferrite de cobalt.

Pour les nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG, la technique solvothermale a été utilisée. Le chlorure de cobalt hexahydraté a été dissous dans 40 mL de glycol éthylène (2,5 mM), suivi de l'ajout de 1,35 g de chlorure de fer hexahydraté et 1 g de PEG. Le mélange a été agité ~30 min puis scellé dans une autoclave AI doublée de Téflon. L'autoclave a été chauffée à 200 °C pendant 8 h, puis refroidie. Le mélange a été lavé à l'eau déionisée et à l'éthanol, séché à 80 °C toute la nuit, puis broyé en poudre fine pour obtenir les nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG (80–100 nm). La morphologie a été investiguée par DRX (méthode Ref. [50]), MEB et MET (Ref. [50, 51]), spectroscopie FTIR à température ambiante pour détermination des groupes fonctionnels (Ref. [51]), spectroscopie Raman, et analyse thermogravimétrique (ATG) (Ref. [52]).

Marquage radioactif des nanomatériaux

Le marquage radioactif des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG a été effectué avec ^99mTc en utilisant le chlorure stanneux comme agent réducteur [53,54,55]. Pour cela, un eluat frais de générateur ^99mTcO₄ (50 µL, activité ~4 mCi) a été préparé en l'ajoutant à 30 µL de suspension de SnCl₂ (1 mg/mL dans 0,5 N HCl). Avec une solution de NaHCO₃ (1 M), le pH a été ajusté à 8–10. Des solutions de nanoparticules et nanosphères (40 µL chacune) contenant ~0,4 % p/p en ferrite de cobalt ont été mélangées avec suspensions de chlorure stanneux (50 µg), acide ascorbique (10 mg/mL) et ^99mTcO₄. Le mélange a été agité à 10 000 tr/min pendant 25 min à 80 °C. Pour des mesures précises, les comptages radioactifs ont été enregistrés dans les 24 h en raison de la courte demi-vie du ^99mTc (~6 h). Le surnageant a été décanté après centrifugation et le matériel restant identifié comme ^99mTc-PEG-ferrite de cobalt nanoparticules et nanosphères. Un chromatogramme sur papier a mesuré les rendements radioactifs des composés marqués, >65 %, reflétant la biodistribution réelle in vivo chez la souris.

Biodistribution des nanomatériaux

Comme indiqué Fig. 1, des souris Kunming SPF (femelles, 6–8 semaines, 18–20 g) ont été obtenues du Centre de laboratoire pour sciences médicales, Université de Lanzhou, Chine. Toutes les souris étaient en cages sous température contrôlée 21–22 °C, lumière 08:00–20:00. Accès libre à la nourriture et l'eau, manipulation selon protocoles du National Society of Medical Research et directives NIH. Les souris ont été divisées aléatoirement en groupes de 5 souris, injectées par voie intraveineuse avec solutions de ^99mTc-PEG-ferrite de cobalt (nanoparticules et nanosphères) et sacrifiées après 1 h, 6 h, 16 h et 24 h. Les tissus du cœur, poumon, foie, rate, rein ont été disséqués, enveloppés dans du papier d'aluminium, pesés, et la radioactivité du ^99mTc mesurée par détecteur à compteur gamma. La biodistribution est présentée en % dose injectée par gramme de tissu humide (% ID/g).

Figure 1. Schéma du modèle expérimental

Coloration hématoxyline-éosine (HE)

Pour la coloration HE, la cire de paraffine a été tranchée en xylène pour déparaffinage, répétée deux fois 10 min chacune. L'hydratation a été réalisée en transférant les lames à travers solutions d'éthanol 100 %, 95 %, 70 % pendant 2 min chacune. Rinçage à l'eau courante 2 min. Les noyaux ont été colorés en solution hématoxyline à 60 °C 10 s puis température ambiante 1 min, puis rinçage à l'eau courante 5 min. Coloration en solution éosine Y de travail 2 min, puis déshydratation par trempage 95 % puis 100 % éthanol 2 min chacun. Le cytoplasme a été coloré 7 s par immersion en solution éosine 15 s. Après retrait, lavage et déshydratation à l'éthanol absolu deux fois 1 min. Le tissu a été clarifié au xylène 15 s et examiné/photographié avec gomme neutre. L'examen microscopique a utilisé un microscope Olympus Microphot-CX41 couplé à caméra numérique.

Indices biochimiques et facteurs inflammatoires

250 µg de nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG ont été injectés par voie intraveineuse dans le groupe d'exposition ; le groupe témoin a reçu du sérum physiologique 0,9 %. Toutes les souris ont été sacrifiées après 24 h. Le sang a été prélevé et centrifugé ~10 min pour obtenir le sérum. Les contenus sériques de TB, ALT, AST, BUN, CREA, Cys-C ont été mesurés par ELISA et western blot. Les enzymes hépatiques, IL-6, IL-8, TNF-α, jouent un rôle clé dans la réponse inflammatoire induite par nécrose. Des niveaux élevés de ces expressions surviennent quand un organe répond à l'inflammation.

Test de viabilité cellulaire MTT

Les potentiels cytotoxiques des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG ont été déterminés par MTT, test colorimétrique évaluant l'activité métabolique cellulaire. Les cellules épithéliales humaines L-132 et monocytes humains THP-1 (Shanghai, Chine) ont été exposées à différentes concentrations de nanoparticules (30–125 µg/mL) et nanosphères (50–250 µg/mL), densité optique mesurée à 590 nm par spectrophotomètre microplaques (UNICO WFZ UV-2000, Shanghai, Chine). Les cellules L-132 ont été sélectionnées car l'inhalation est une voie majeure d'exposition aux nanomatériaux ; les cellules THP-1 pour leur rôle dans l'élimination des corps étrangers. Dans chaque test, les cellules non traitées servaient de témoin négatif. L'inhibition de l'activité enzymatique a été observée, comparée aux témoins négatifs, valeurs dérivées en rapport témoin négatif et tracées contre la concentration.

Analyse statistique

Chaque point de données rapporté comme valeur moyenne (±sem) d'expériences en triplicat. La significativité des différences évaluée par analyse de variance, graphiques statistiques tracés avec Origin et Microsoft Excel.

Résultats et discussion

Analyse structurale

Les analyses structurales (DRX, FTIR, Raman, ATG) des nanomatériaux préparés sont montrées Fig. 2. Les résultats DRX Fig. 2a représentent la ferrite de cobalt enrobée et non enrobée à l'échelle nanométrique, confirmant la fabrication réussie. Les positions et intensités relatives de tous les pics observés confirment la nature cristalline. Aucun pic supplémentaire n'a été observé, indiquant la pureté. La taille cristalline moyenne a été déterminée par l'équation de Scherrer [56], ~24 nm. La spectroscopie FTIR a investigué la distribution des cations (nickel, cobalt, fer) dans la ferrite de cobalt. La Fig. 2b montre les données FTIR à température ambiante. Théoriquement, la ferrite de cobalt a deux bandes d'absorption fortes (ʋ₁ et ʋ₂) avec quelques autres dans 400–600 cm⁻¹. Tous ces pics sont clairement indiqués. Dans les données FTIR, ʋ₁ correspond aux vibrations d'étirement intrinsèques du métal aux sites tétraédriques, ʋ₂ aux vibrations d'étirement des ions métalliques aux sites octaédriques [57,58,59]. Le pic à 3421 cm⁻¹ correspond au PEG, indiquant sa liaison réussie à la surface. L'analyse Raman à température ambiante (Fig. 2c) montre 5 pics différents. Le pic <700 cm⁻¹ est le pic caractéristique principal (mode A_1g) de la ferrite de cobalt, correspondant à l'étirement des ions oxygène le long des liaisons Fe–O aux sites tétraédriques [60], les autres pics appartenant aussi à la ferrite de cobalt. Cela confirme la fabrication réussie de PEG-ferrite de cobalt. La Fig. 2d montre les résultats ATG 50–380 °C indiquant que la ferrite de cobalt perd du poids à différentes températures. Il est évident que la stabilité thermique du PEG est relativement faible alors que celle du PEG-ferrite de cobalt est élevée.

Figure 2. a Résultats DRX de la ferrite de cobalt. b Spectroscopie FTIR 500–4000 cm⁻¹. c Spectre Raman température ambiante 190–1000 cm⁻¹. d ATG du PEG-CoFe₂O₄ 50–400 °C

Les analyses par microscopie électronique sont montrées Fig. 3. Fig. 3(a) et (b) images MEB des nanoparticules et nanosphères enrobées de PEG ; Fig. 3(c) et (d) analyses MET des nanosphères et nanoparticules. Ces résultats montrent une taille moyenne ~25 nm pour les nanoparticules et 80–100 nm pour les nanosphères. D'après les images MET des nanosphères, il est évident qu'elles sont composées d'un grand nombre de nanoparticules plus petites avec de grandes surfaces, les rendant mésoporeuses, hautement désirables pour applications médicales comme vecteurs de médicaments. Toutes ces analyses confirment la formation réussie de nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG, phase pure.

Figure 3. MEB nanoparticules (a) et nanosphères (b). MET nanoparticules (c) et nanosphères (d) enrobées de PEG, résolutions différentes

Études de biodistribution

Quantitativement, la biodistribution des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG dans le sang, cœur, foie, rate, poumon, rein après 1, 6, 16, 24 h est montrée Fig. 4. La présence a été évaluée dans les 24 h après injection intraveineuse de ^99mTc-PEG-ferrite de cobalt. Pour les nanosphères (Fig. 4a), la rétention sanguine était 6,5 ± 0,33 % ID/g après 1 h, puis diminuée graduellement. Les nanosphères étaient principalement distribuées dans cœur, foie, rate, poumon, rein ; principalement accumulées dans la rate. La biodistribution dans les organes était maximale après 1 h puis diminuée graduellement, <30 % après 6 h. Pour les nanoparticules (Fig. 4b), la rétention sanguine était ~2,8 ± 0,14 % ID/g après 1 h, indiquant une clairance relativement rapide, puis diminuée avec le temps. Les nanoparticules étaient distribuées dans les mêmes organes avec concentrations maximales dans rate et foie. La biodistribution était maximale après 1 h puis diminuée après 6 h, valeurs minimales après 24 h. En comparant, l'accumulation/présence des nanosphères enrobées de PEG dans le sang et organes était plus importante que les nanoparticules. Cela pourrait être associé à la grande surface et porosité élevée des nanosphères vs nanoparticules, facteur critique de réactivité avec les systèmes biologiques. Les nanoparticules, de nature non mésoporeuse avec surface spécifique faible, sont moins réactives. Ces caractéristiques pourraient réduire la résistance prolongée des nanoparticules enrobées de PEG dans le sang et organes. De plus, les nanosphères forment des complexes avec biomolécules, augmentent les espèces radicalaires, le stress oxydatif, endommagent l'ADN cellulaire, et causent le stress oxydatif par peroxydation lipidique.

Figure 4. Biodistribution du PEG-CoFe₂O₄ dans sang, cœur, foie, rate, poumons, rein après intervalles (1, 6, 16, 24 h) exposés aux nanosphères (a) et nanoparticules (b)

Indices biochimiques

Pour étudier l'effet toxique des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG chez la souris, les indices biochimiques ont été mesurés (Fig. 5). Divers paramètres : ALT, AST, BUN, CREA, TB, Cys-C mesurés pour groupes témoin et exposition. Logiciel SPSS utilisé avec *P < 0,05 pour changements significatifs. Pour les deux nanosphères et nanoparticules, tous les indices montrent des changements significatifs vs témoin (*P < 0,05). Pour l'exposition aux nanosphères, ALT, AST, BUN montrent différences significatives (*P < 0,05) vs témoin ; pour nanoparticules, seulement Cys-C montre différence significative (*P < 0,05). TB et Cys-C, biomarqueurs rénaux, diminuent significativement pour nanosphères. Cela suggère que le rein est plus affecté par l'exposition aux nanosphères qu'aux nanoparticules. AST, biomarqueur hépatique, affecté par les deux expositions. Cela suggère que l'exposition à la ferrite de cobalt peut affecter la fonction hépatique. De tous ces résultats, les nanosphères enrobées de PEG causent plus de dommages in vivo que les nanoparticules.

Figure 5. Indices biochimiques dans le sérum sanguin des groupes témoin, nanoparticules, nanosphères. Données : moyenne ± ÉT de deux expériences indépendantes en triplicat. *P < 0,01

Étude histopathologique

Nous présentons l'analyse histopathologique des groupes témoin, nanoparticules, nanosphères, traitement (Fig. 6). En comparant les groupes d'exposition nanosphères et nanoparticules au témoin, les nanosphères produisent plus de dommages dans foie, rate, rein, poumon. Dans le rein, congestion glomérulaire avec œdème léger et cellules inflammatoires interstitielles pour nanosphères vs nanoparticules et témoin. Les nanoparticules montrent moins d'inflammation. Pour nanoparticules, poumons relativement moins affectés ; pour nanosphères, paroi alvéolaire épaissie et fibrose légère. De plus, pour nanosphères, hépatocytes gonflés et œdème, vs moins d'inflammation pour nanoparticules.

Figure 6. Coupes histologiques des tissus des différents groupes (témoin, nanoparticules, nanosphères, traitement)

Facteurs inflammatoires et niveaux d'oxydation/antioxydation

Les niveaux d'expression de IL-6, IL-8, TNF-α, MDA, T-AOC ont été mesurés (Fig. 7). Fig. 7a : bandes western blot de IL-6, IL-8, β-actine pour groupes témoin, nanoparticules, nanosphères. Fig. 7b : niveaux protéiques relatifs de IL-6, IL-8. Fig. 7c–e : contenus de TNF-α, MDA, T-AOC avec *P < 0,05 groupe exposition vs témoin ± sem. Les résultats révèlent que les niveaux de IL-6, IL-8, TNF-α, MDA pour le groupe nanosphères sont plus élevés que nanoparticules, et les deux plus élevés que témoin. Pour T-AOC, le niveau nanosphères est plus bas que nanoparticules et témoin. Tous ces résultats indiquent que nanoparticules et nanosphères causent inflammation, surtout au foie. Cependant, les nanosphères affectent plus les organes. Il est connu que les nanomatériaux génèrent des radicaux libres d'oxygène (ROS), causant réductions qualitatives des antioxydants, dommages d'oxydation des tissus biologiques affectant les organismes cellulaires [61,62]. De plus, en comparant les niveaux pour souris exposées aux nanoparticules vs nanosphères, les nanosphères entraînent plus d'inflammation.

Figure 7. Expressions de IL-6, IL-8, TNF-α, MDA, T-AOC. a Bandes western blot IL-6, IL-8, β-actine groupes témoin, nanoparticules, nanosphères. b Niveaux relatils d'expression IL-6, IL-8. c Contenu TNF-α. d Niveau MDA. e Graphique statistique T-AOC groupes témoin et exposition (nanoparticules, nanosphères). (*P < 0,05 groupes exposition vs témoin ± sem)

Évaluation de la cytotoxicité

Les études de cytotoxicité pour différentes concentrations de nanosphères et nanoparticules enrobées de PEG ont été menées (Fig. 8). Le pourcentage de survie des cellules L-132 Fig. 8(a), cellules THP-1 Fig. 8(b). Pour concentrations >100 µg/mL, changements significatifs de viabilité pour les deux cellules, plus prononcés pour nanosphères PEG. Cela confirme que les nanosphères produisent plus de dommages que nanoparticules. De plus, la viabilité diminue avec l'augmentation de concentration des deux formes, indiquant que la ferrite de cobalt enrobée de PEG sous les deux formes produit plus de toxicité avec concentration croissante. En raison de deux cibles cellulaires différentes (L-132, THP-1), la réponse cellulaire peut ne pas être identique, selon le mécanisme de mort cellulaire [63]. Une raison possible des spécificités cibles même pour tailles similaires peut être attribuée à la phagocytose, caractérisant les monocytes (THP-1), pas les cellules épithéliales pulmonaires [64]. Une nanosphère unique est composée de nombreuses petites nanoparticules, possédant grande surface vs nanoparticules, donc plus de réactivité et d'interactions avec systèmes biologiques. De plus, du fait de leur taille plus grande, les nanosphères ne sont pas facilement sécrétées par sang ou urine une fois dans l'organe, restant plus longtemps, affectant les tissus. De plus, les nanosphères causent réduction de la fonction des macrophages, phagocytose réduite, mobilité réduite et dysfonction cytosquelettique.

Figure 8. Cytotoxicité des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG sur cellules L-132 (a) et THP-1 (b). *P < 0,01 et **P < 0,05 vs témoins non traités. Données : moyenne ± ÉT de deux expériences indépendantes en triplicat

Effet de la curcumine sur la toxicité

Les indices biochimiques dans le sérum ont été étudiés pour groupe exposition nanosphères et groupe traité curcumine, comparés au témoin (Fig. 9). Tous ces indices dans le groupe traité montraient des améliorations significatives après administration de curcumine comparés aux groupes exposition nanosphères et témoin. Dans la figure, les niveaux d'expression de ALT, AST, BUN, CREA, CYS-C, TB tendaient vers les valeurs normales après curcumine. Cela s'attribue aux fortes caractéristiques antioxydantes de la curcumine réduisant le stress oxydatif de la toxicité induite par la ferrite de cobalt [47]. Il a été rapporté que TNF-α et IL-1 jouent rôle important dans l'induction de nécrose hépatique et la curcumine réduit la toxicité en inhibant la sécrétion de TNF-α et IL-1 par macrophages [48], similaire à Ref. [65].

Figure 9. Indices biochimiques dans le sérum des groupes témoin, exposition nanosphères, traitement (*P < 0,05 vs témoins non traités)

Conclusion

Dans ce travail, nous avons fabriqué avec succès des nanoparticules et nanosphères de ferrite de cobalt enrobées de PEG via méthodes hydrothermale et solvothermale. D'après les analyses structurales, les nanomatériaux sont hautement purs, cristallins et biocompatibles grâce à la liaison réussie du PEG. Les deux nanosphères et nanoparticules sont toxiques pour les systèmes biologiques. Les nanosphères sont plus toxiques que les nanoparticules en raison de leur grande surface et réactivité accrue avec tissus biologiques. Des changements positifs ont été observés dans les indices biochimiques après administration de curcumine, composé naturel sans effets secondaires, confirmant son utilisation comme agent de guérison pour la toxicité induite par les nanosphères de ferrite de cobalt.

Historique des modifications

Abréviations

PEG :
Polyéthylène glycol

DRX :
Diffraction des rayons X

FTIR :
Spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier

ATG :
Analyse thermogravimétrique

SPF :
Exempts de pathogènes spécifiques

IRM :
Imagerie par résonance magnétique

TNF :
Facteur de nécrose tumorale

HE :
Hématoxyline-éosine

AI :
Acier inoxydable

DI :
Déionisé

MEB :
Microscopie électronique à balayage

MET :
Microscopie électronique à transmission

TB :
Bilirubine totale

ALT :
Alanine aminotransférase

AST :
Aspartate aminotransférase

BUN :
Urémie

CREA :
Créatinine

Cys-C :
Cystatine C

ADN :
Acide désoxyribonucléique

MDA :
Test malondialdéhyde

ROS :
Radicaux libres d'oxygène

T-AOC :
Capacité antioxydante totale

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