L'administration de tétraèdres par ADN améliore l'apoptose induite par la doxorubicine des cellules HT-29 du cancer du côlon

Contexte

La doxorubicine (Dox) est l'un des agents antinéoplasiques les plus largement utilisés, et de nombreuses études cliniques ont démontré que la Dox peut entraver de manière frappante la croissance des cellules tumorales dans divers cycles de croissance cellulaire en inhibant la synthèse d'ARN et d'ADN [1, 2]. Des études antérieures suggéraient que la prolifération des cellules tumorales était effectivement bloquée en phase G1 et que la métastase était également inhibée par Dox à une certaine concentration [3]. De plus, une inhibition efficace peut être obtenue à une dose relativement plus faible par rapport à d'autres médicaments anticancéreux [4]. Cependant, les effets secondaires généralement induits par Dox résultaient du manque de ciblage spécifique des cellules tumorales et de l'inhibition non sélective de l'ADN et de l'ARN, ce qui limitait sérieusement les applications cliniques [5, 6]. Parallèlement, la faible capacité d'apport cellulaire réduit l'accumulation de Dox dans les cellules tumorales [7]. Par conséquent, un système de livraison efficace pour Dox devrait être développé pour rendre Dox un ciblage plus spécifique et efficace, plus facile à encapsuler, et d'une excellente capacité d'absorption et bio-compatibilité.

Les transporteurs de médicaments de taille nanométrique, tels que les liposomes et les nanoparticules inorganiques, peuvent faciliter la pénétration de Dox dans la membrane cellulaire tumorale, améliorant ainsi l'efficacité du ciblage [8]. Néanmoins, l'administration à base de liposomes ne peut pas réduire les effets secondaires sur les cellules normales en raison du ciblage relativement faible; pendant ce temps, les supports inorganiques, tels que les nanoparticules de silice mésoporeuses, ne peuvent pas être complètement biodégradés in vivo, ce qui entrave le processus d'absorption ultérieure du médicament et entraîne une biotoxicité potentielle. Pour ces systèmes de délivrance fonctionnels, la complexité de la préparation, l'inhomogénéisation des structures de nanoparticules et la faible efficacité d'encapsulation entravent les expansions cliniques [9,10,11]. En tant que transporteur de médicament de taille nanométrique avec d'excellentes performances d'administration de médicament, les structures à base d'ADN, telles que le tétraèdre d'ADN (tétra d'ADN), peuvent pénétrer la membrane en évitant l'incompatibilité entre l'ADN électronégatif et la membrane plasmique [12,13, 14,15,16,17]. Les médicaments et les molécules de ciblage peuvent être tous deux liés de manière covalente au tétraèdre d'ADN. De plus, l'absorption et la biodégradation faciles des séquences tétraédriques d'ADN évitent une rétention à long terme. Les médicaments aptamères riches en guanine, tels que l'AS1411, ont été administrés avec succès dans les cellules tumorales A549 et utilisés comme agents de ciblage et inhibiteurs [18]. Des facteurs de régulation immunitaire, tels que le CpG et l'ARNsi, peuvent également être délivrés aux cellules tumorales via un tétra transporteur d'ADN pour réguler les réponses immunitaires [19]. Avec les avantages d'une faible toxicité, d'une biocompatibilité appropriée et d'un ciblage ajustable, DNA tetra a montré une biosécurité et des potentiels pour l'administration de Dox.

Dans cette étude, des particules fonctionnelles de tétraèdre d'ADN assemblées avec Dox en tant que médicament anticancéreux et l'acide folique en tant que molécules de reconnaissance spécifiques [20], ont été conçues, synthétisées et caractérisées. L'efficacité anticancéreuse a été évaluée sur des cellules cancéreuses du côlon en tenant compte des récepteurs de folate régulés à la hausse de manière significative à la surface de la membrane cellulaire. Plus précisément, le niveau d'absorption cellulaire, le degré d'apoptose induite par Dox et l'inhibition de la prolifération cellulaire ont été mesurés sur des lignées cellulaires HT-29.

Méthodes

Régents et équipement

Les chaînes d'oligonucléotides d'ADN ont été achetées auprès de TAKARA à Dalian, Chine. Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le sérum bovin fœtal ont été achetés auprès de Gibco à NY, USA. La pénicilline et la streptomycine ont été achetées auprès de Beyotime biotechnologie à Shanghai, en Chine. Acide folique, doxorubicine, 3-(4,5-diméthyl-2-thiazolyl)-2,5-diphényl-2-H -le bromure de tétrazolium (MTT) et l'agarose ont été achetés auprès de Sigma-Aldrich à MO, USA. Tous les anticorps ont été achetés auprès de la société Abcam à Shanghai, en Chine. D'autres réactifs ont été achetés auprès de Sinopharm Chemical Regent Co., Ltd., à Shanghai, en Chine.

Le spectrophotomètre UV-Vis (Thermo Evolution 201) et l'incubateur à température constante ont été achetés auprès de Thermo Fisher aux États-Unis ; la centrifugeuse (GT10-1) a été achetée auprès de Beijing Era Beili Centrifuge Co., Ltd.; le spectrophotomètre à fluorescence (UV-1800) a été acheté auprès de Shimadzu Corporation. La microscopie confocale à balayage laser (Visitech) a été achetée auprès des sociétés Leica ; l'instrument de réaction en chaîne par polymérase (PCR, T100), l'électrophorèse des protéines et l'appareil d'électrophorèse des acides nucléiques ont été achetés auprès de Bio-Rad Company; un analyseur dynamique de taille de particules lumineuses a été acheté auprès de Beckman Company; des plaques de culture cellulaire à 96 ou 24 puits ont été achetées auprès de Dow Corning Corporation. La chromatographie liquide haute performance (HPLC, Agilent 1200) avec colonne C18 a été achetée auprès d'Agilent Technologies.

La lignée cellulaire de cancer du côlon humain HT-29 a été maintenue dans du DMEM additionné de 10 % de sérum de veau fœtal, 100 U/mL de pénicilline et 100 μg/mL de streptomycine dans une atmosphère humidifiée contenant 95 % d'air et 5 % de dioxyde de carbone à 37 °C .

Synthèse et purification d'ADN tétraèdre

Dans cette enquête, la synthèse a suivi les procédures schématiques de la figure 1, et les séquences d'ADN simple brin (ADNsb) du tétraèdre d'ADN sont également fournies sur la figure 1. Dans les détails, chaque ADNsb a été dissous dans un tampon TE 0,5 ×, et la valeur de densité optique (DO) correspondante de l'ADN a été déterminée par spectrophotomètre UV à 260 nm. Du tampon TE supplémentaire a été ajouté pour produire quatre chaînes à la même concentration. Le rapport de mélange de quatre ADNsb était de 1:1:1:1 à 1 μM dans 100 μL. La réaction a été réalisée dans une machine de réaction en chaîne par polymérase (PCR) avec les conditions de cyclage :95 °C, 10 min, refroidi naturellement à 4 °C. Tout l'ADN simple brin a été purifié par HPLC avec 260 nm comme pic d'absorption caractéristique. Dans le spectre HPLC, le temps de pic de l'ADN tétra était plus rapide que celui du simple brin, et le produit a été collecté au moment correspondant.

Diagramme schématique de l'acide folique-ADN tétra-Dox, de l'ADN tétra-Dox et de l'acide folique-ADN tétra. Les séquences d'ADN simple brin du tétraèdre d'ADN ont été fournies. Le processus de ciblage des cellules tumorales, de pénétration à travers la membrane cellulaire et d'insertion des ADN a été décrit

Synthèse et caractérisation de l'acide folique-ADN tétra-Dox

Les groupes hydrogène libres de Dox et d'acide folique ont été modifiés avec un groupe azoture puis couplés avec 3'-OH de l'ADNsb via une réaction de chimie click [21]. Lors de l'ajout d'une quantité différente d'ADN ss marqué par un groupe fonctionnel, le rapport des groupes fonctionnels pourrait être contrôlé de manière stoechiométrique via une hybridation spécifique des chaînes latérales. Pour la synthèse de l'acide folique-ADN tétra, le rapport molaire de l'acide folique et de l'ADN tétraèdre a été fixé à 1:1. Pour la synthèse d'ADN tétra-Dox, le rapport molaire de Dox et d'ADN tétraèdre a été fixé à 4:1. Pour la synthèse d'acide folique-ADN tétra-Dox, le rapport molaire acide folique, ADN tétraèdre et Dox a été respectivement fixé à 1:1:3. Toutes les synthèses ont été réalisées au niveau micromolaire à 37 °C puis conservées à 4 °C [22].

Dans cette étude, la série de complexes d'ADN tétra a été caractérisée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PAGE) avec un gel de séparation à 8 % (39 % Acr-Bis) pour vérifier la pureté et les tailles moléculaires relatives. Les échantillons étaient constitués des différentes structures tétra d'ADN et d'un tampon de chargement 6x avec un rapport de mélange de 2:1. Les échantillons ont été colorés et analysés après une électrophorèse sur gel pendant 90 minutes à 110 V. Pour déterminer les différences sur la taille des particules, des échantillons d'ADN tétra ont également été scannés par des instruments de diffusion dynamique de la lumière (DLS) avec une lumière dynamique.

Capture cellulaire tétra-facilitée par l'ADN

Pour les différentes structures de couplage conçues dans cette recherche, les taux d'absorption par les cellules HT-29 ont été comparés pour déterminer l'efficacité d'administration du médicament. L'efficacité d'absorption cellulaire a été évaluée et quantifiée en utilisant le spectre de fluorescence caractéristique de Dox, c'est-à-dire la lumière d'excitation à 470 nm et la lumière d'émission à 590 nm. Les cellules HT-29 à 2 × 10 ⁵ /mL ont été ensemencés dans des plaques à 24 puits et cultivés pendant 24 h. Les cellules ont été incubées avec diverses structures d'ADN tétra à 10 μM pendant encore 24 h. Le milieu a ensuite été jeté, et les cellules ont été rincées trois fois avec du PBS. Pour la fixation des cellules, 4 % de paraformaldéhyde ont été immédiatement ajoutés à température ambiante pour une co-incubation de 30 min, et les cellules ont été rincées à nouveau trois fois avec du PBS. Enfin, les plaques à 24 puits ont été observées au microscope confocal laser pour comparer l'efficacité d'absorption cellulaire en fonction de l'intensité lumineuse de la lumière émise.

Cytotoxicité et efficacité anticancéreuse

La cytotoxicité et l'efficacité anticancéreuse ont été évaluées à l'aide du test MTT, où une réaction redox se produit entre le MTT dans le DMSO et la succinate déshydrogénase intracellulaire. Les cellules HT-29 ont été ensemencées dans des plaques de culture à 96 puits et cultivées pendant 24 h.

Pour la cytotoxicité de l'ADN tétra en tant que support de médicament, un milieu contenant des structures d'ADN tétra à la concentration de 0 à 100 μM a été ajouté pour une autre incubation de 24 ou 48 heures. Ensuite, 100 μL de solution de MTT (5 mg/mL) ont été ajoutés à chaque puits et le mélange a été incubé à 37 °C pendant 4 h. Le liquide a ensuite été éliminé et les cellules ont été lysées et dissoutes avec 200 μL de DMSO. L'absorbance du surnageant a été mesurée à 570 nm par Microreader. L'échantillon HT-29 non traité a été considéré comme groupe témoin.

Pour le tétraèdre à ADN couplé à l'acide folique ou au Dox, d'une part, les recherches ont porté sur la stabilité, la biosécurité et l'efficacité d'inhibition; d'autre part, si le Dox de l'ADN tétra-Dox a des propriétés antitumorales comparables à celles d'avant ou non a également été exploré. Par conséquent, la cytotoxicité et l'efficacité antitumorale des complexes ADN tétra ont été évaluées. Les complexes respectivement à 100 μM ont été incubés avec des cellules HT-29. Des échantillons de cellules ont été collectés toutes les 6 h, puis détectés par un test MTT pour évaluer l'effet de la période d'incubation. Des attentions particulières ont été portées à la différence d'efficacité anticancéreuse résultant des variations de structures. De plus, les effets de la concentration sur l'inhibition de HT-29 après avoir été traité avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox ont été évalués à 0-200 μM via des tests MTT.

Western Blot et cytométrie en flux

Pour caractériser l'apoptose cellulaire induite par Dox facilitée par l'administration d'ADN tétra, des échantillons de protéines provenant de cellules traitées ont été chauffés et craqués à l'aide d'un liquide de pyrolyse, analysés par SDS-PAGE à 12 % dans des conditions de 100 V à courant constant pour séparer les échantillons, puis transférés à des membranes PVDF de 0,22 µm de diamètre pendant 1 h. Les échantillons ont été bloqués avec du lait écrémé pendant 1 h. Après avoir été lavés trois fois avec du PBST, les échantillons ont été incubés pendant une nuit avec de l'anti-caspase-3 de lapin. Ensuite, les échantillons ont été sondés avec un anticorps secondaire IgG anti-lapin de chèvre pendant 1 h, puis lavés avec du PBST et imagés via le système d'imagerie protéique Bio-Rad. De plus, GAPDH a été choisie comme protéine de référence interne en raison de son expression stable dans les cellules.

La cytométrie en flux a en outre été utilisée pour quantifier les niveaux d'apoptose à la concentration et au point temporel sélectionnés via des tests MTT. Les cellules HT-29 ont été incubées avec des inhibiteurs pendant un certain temps, puis mesurées par cytométrie de flux quantitative en utilisant la méthode de double coloration à l'Annexine V-PI.

Quantification de la prolifération cellulaire

La méthode de comptage cellulaire a été utilisée pour quantifier la prolifération cellulaire avec le temps. En détail, après avoir été traitées avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox pendant une période de temps à 100 μM, les cellules ont été digérées par 0,25 % de trypsine pendant 30 s, puis le même volume de milieu complet a été ajouté pour terminer la réaction. Le surnageant a été jeté après centrifugation à 1000 tr/min pendant 3 min, et les cellules ont été remises en suspension avec du milieu complet. Le nombre de cellules dans chaque point de détection a été enregistré au microscope optique à l'aide de plaques de comptage cellulaire, de manière à tracer la courbe de prolifération cellulaire.

Analyse statistique

Dans cette recherche, les significations des différences ont été déterminées à l'aide du t de Student. test (bilatéral; variance égale pour deux échantillons). P < 0,05 signifie des différences significatives entre les différents groupes.

Résultats

Préparation d'acide folique-ADN tétra-Dox

Dans un processus de synthèse spécifique, Dox a été mélangé avec du tétraèdre d'ADN dans différentes proportions pour terminer le chargement et l'assemblage de Dox (w _m = 543,52) et de l'acide folique (w _m = 441.4). Comme le montre la figure 2a, du fait que la Dox et l'acide folique sont des monomères de poids moléculaire relativement faible et similaire, l'ADN dans un tétraèdre et les conjugués avec une molécule fonctionnelle avaient des poids moléculaires à peu près équivalents. Cependant, l'assemblage de Dox ou d'acide folique avec les quatre sommets d'ADN du tétraèdre a fait augmenter la taille moléculaire de l'ADN tétra de toute évidence. Comme le montre la figure 2b, la plus grande partie de la taille des monomères tétraédriques de l'ADN était inférieure à 15 nm. Avec l'augmentation des groupes de couplage, la structure symétrique de l'ADN tétra a été détruite et le milieu des tailles de particules des composés a augmenté de manière significative. En particulier, l'expansion de la taille de l'acide folique-ADN tétra-Dox a étendu le diamètre du milieu à 20 nm.

Caractérisation de l'ADN tétra avec différents constituants. un De gauche à droite :échelle d'ADN, ADN tétra, acide folique-ADN tétra, acide folique-ADN tétra-Dox et ADN tétra-Dox imagés dans 8 % SDS-PAGE. b La distribution de taille de l'ADN tétra, de l'acide folique-ADN tétra, de l'acide folique-ADN tétra-Dox et de l'ADN tétra-Dox détectés par diffusion dynamique de la lumière

Efficacité d'administration des médicaments

Après avoir été incubé avec différentes structures d'ADN tétra pendant 24 h, l'efficacité intracellulaire de Dox a été évaluée par imagerie par fluorescence, où la fluorescence rouge intracellulaire est la fluorescence caractéristique de Dox ; par conséquent, les cellules incubées avec l'ADN tétra n'ont présenté aucun signal fluorescent comme le montre la figure 3a, et les signaux rouges des cellules incubées avec les complexes acide folique-ADN tétra-Dox et ADN tétra-Dox étaient évidemment plus élevés que ceux avec Dox, ce qui signifie l'efficacité d'absorption cellulaire considérablement améliorée du Dox résultant de la pénétration de l'ADN tétra a facilité la pénétration à travers la membrane, ainsi que la stabilité intracellulaire des conjugués entre le Dox et l'ADN tétra.

L'efficacité d'absorption des cellules HT-29 après avoir été incubées avec différents complexes pendant 24 h. un Détection par microscopie confocale (le rouge est la lumière d'excitation de fluorescence de Dox, barre d'échelle = 10 μm). b Intensité de la fluorescence cellulaire. **P < 0,05 par rapport au groupe d'ADN tétra

L'analyse quantitative supplémentaire de l'intensité de fluorescence (Fig. 3b) a mis en évidence les résultats visuels, et il n'y avait pas de différence significative entre les complexes acide folique-ADN tétra-Dox et ADN tétra-Dox (P < 0,05). La méthodologie de co-incubation de médicaments et de cellules entrave l'exposition complète de la capacité de ciblage de l'acide folique. La concentration relativement élevée a confirmé la reconnaissance spécifique des récepteurs du folate, ce qui est théoriquement plus évident dans les applications in vivo avec le système circulant complexe. En bref, la livraison d'ADN tétra garanti l'efficacité anticancéreuse de Dox.

Cytotoxicité et efficacité anticancéreuse

Tout d'abord, la viabilité des cellules HT-29 co-incubées avec différentes concentrations d'ADN tétra a été examinée à l'aide du test MTT. Il n'y avait pas de cytotoxicité évidente du traitement à l'ADN tétra dans les cellules HT-29 à 0-100 μM pendant 24 et 48 h (Fig. 4a). Par conséquent, le tétraèdre d'ADN de taille nanométrique a fourni une plate-forme de support de médicament bio-sûr.

La cytotoxicité et l'efficacité antitumorale des complexes Dox et de l'ADN tétra pour les cellules HT-29. un La viabilité des cellules HT-29 incubées avec de l'ADN tétra à différentes concentrations pendant 24 ou 48 h. b L'efficacité antitumorale des complexes Dox à 100 μM. c La viabilité des cellules HT-29 incubées avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox à différentes concentrations pendant 24 ou 48 h

Deuxièmement, en raison de la différence d'efficacité d'administration de Dox, l'acide folique-ADN tétra-Dox et l'ADN tétra-Dox présentaient une efficacité d'inhibition plus significative dans les 48 h (Fig. 4b). En raison du manque de composants anticancéreux efficaces, l'ADN de l'acide tétra-folique entraîne une diminution négligeable (<10 %) de la viabilité au cours de la co-incubation de 48 h. En raison du fait que Dox ne peut pas pénétrer objectivement la membrane, la diminution de la viabilité cellulaire induite par Dox était inférieure à celle des autres groupes. En particulier, le tétra-Dox acide folique-ADN a montré une diminution plus précoce et significative 6 h après l'incubation, prouvant que le ciblage de l'acide folique aide les médicaments à se localiser au niveau de la membrane et fait que le Dox fait effet plus rapidement. En revanche, l'ADN tétra-Dox a manifestement commencé à faire effet 12 h après l'incubation, ce qui démontre l'importance de cibler les groupes.

De plus, les cellules HT-29 ont été traitées avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox à 0-200 μM pour détecter la concentration efficace (Fig. 4c). La viabilité cellulaire des cellules HT-29 diminuait rapidement avec l'augmentation de la concentration (0-100 μM) du complexe, mais il n'y avait pas de différences significatives entre la concentration de 100 et 200 μM, indiquant une manière dose-dépendante de l'acide folique-ADN tétra- Dox, où 100 μM peuvent être considérés comme une concentration efficace pour un effet antitumoral. De plus, la viabilité cellulaire a changé de manière significative de 24 à 48 h pour les groupes de 10, 20 et 50 μM, indiquant que la période d'incubation était également un facteur affectant l'efficacité anticancéreuse basée sur l'acide folique et l'ADN tétra-Dox.

Apoptose induite par l'acide folique-ADN tétra-Dox

En conséquence, sur la base des tests western blot (Fig. 5a), il y avait une augmentation significative de l'expression de la caspase-3 induite par l'acide folique-ADN tétra-Dox et l'ADN tétra-Dox, prouvant que l'apoptose était la principale voie de Dox- mort cellulaire induite.

L'expression cellulaire de la caspase-3 liée à l'apoptose après avoir été traitée avec différents complexes (a ) et la cytométrie en flux de cellules HT-29 après avoir été incubées avec de l'ADN tétra, du Dox, de l'ADN tétra-Dox et de l'acide folique-ADN tétra-Dox (b –e )

La cytométrie en flux (Fig. 5b-e) a en outre prouvé qu'une incubation de 6 heures avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox à 100 μM induisait une apoptose de 68,7 %. Pendant ce temps, les niveaux d'apoptose induits par le Dox et l'ADN tétra-Dox n'étaient que de 32,8 et 60,5 % avec les mêmes conditions d'incubation.

Inhibition de la prolifération cellulaire

Sur la base des tests MTT, 100 μM était la concentration efficace pour l'induction de l'apoptose et a été sélectionnée dans l'expérience de prolifération cellulaire. Comme le montre la courbe de prolifération cellulaire (Fig. 6), en raison du processus fastidieux d'absorption cellulaire, l'inhibition de la prolifération cellulaire n'a pas été totalement démontrée pendant le stade précoce de la co-incubation. Un effet inhibiteur significatif a été présenté après avoir été incubé avec de l'acide folique-ADN tétra-Dox pendant plus de 6 h, prouvant l'existence d'une endocytose améliorée par l'ADN. Pendant ce temps, 6 h est une période de temps comparative avec la période de temps effective détectée sur la figure 4b.

Inhibition de la prolifération cellulaire induite par l'incubation avec l'acide folique-ADN tétra-Dox à 100 μM pour différentes périodes de temps

Discussion

En tant que moyen courant de modification de l'ADN, la réaction chimique par clic présentait les avantages d'une efficacité de réaction élevée, d'un bon contrôle et d'une opération facile [21]. Électrophorétogramme affiché avec une seule marque (Fig. 2a), indiquant que les produits de haute pureté ont été obtenus par couplage covalent via une réaction chimique click. La propriété fluorescente du Dox le rend traçable in vitro et in vivo; pendant ce temps, la fluorescence à l'intérieur des cellules tumorales a prouvé indirectement la stabilité de l'acide folique-ADN tétra-Dox pendant le processus de pénétration à travers la membrane cellulaire. Par conséquent, le tétra-Dox acide folique-ADN était capable et stable pour les applications biomédicales.

L'ADN tétra a la capacité de délivrer des médicaments dans les cellules. Toutes les séquences d'ADN utilisées dans cette recherche n'étaient codées pour aucune information génétique. Ainsi, aucun effet secondaire sur l'expression des gènes et le métabolisme cellulaire n'a été signalé dans tous les examens. Pendant ce temps, en raison de la forte expression du récepteur du folate à la surface des cellules tumorales, l'acide folique est sélectionné comme molécules de ciblage spécifiques du système d'administration de médicament pour améliorer l'efficacité d'absorption des complexes ADN tétra. Cependant, dans les circonstances de l'ADN tétra à une concentration relativement élevée, l'avantage du ciblage des récepteurs du folate n'a pas été pleinement reflété in vitro. En conséquence, pour une application in vivo, l'acide folique était susceptible d'améliorer l'efficacité du ciblage dans le système circulant complexe.

Actuellement, les médicaments anticancéreux entraînent généralement des effets secondaires inattendus, de sorte que la recherche sur l'amélioration de la capacité de ciblage des cellules tumorales et de l'efficacité de l'administration a été un sujet brûlant [23, 24, 25]. Des études antérieures ont montré que la capacité du tétraèdre d'ADN à transporter des médicaments était basée sur sa bonne compatibilité. Le tétraèdre d'ADN est un conteneur artificiel de modification favorable et de biocompatibilité appropriée. Dans cette étude, le couplage réussi de Dox et d'acide folique avec le tétraèdre d'ADN a obtenu un effet inhibiteur satisfaisant et a conduit à une apoptose évidente de la cellule HT-29. Grâce au fait que l'ADN tétra peut être modifié et couplé avec des médicaments et des molécules de ciblage, l'enrichissement de la concentration locale de médicament dans la cellule tumorale a été réalisé. Les résultats ci-dessus ont prouvé la bonne reconnaissance des cellules tumorales et l'effet inhibiteur accru correspondant via l'administration de tétra d'ADN, et ce système d'administration de médicaments de taille nanométrique peut être utilisé plus largement.

Conclusions

En tant que stratégie d'administration de médicaments nouvellement développée, les structures d'ADN de taille nanométrique sont peu coûteuses, très stables et réalisables à synthétiser ; en attendant, il est bio-sûr en raison du manque d'activité immunitaire exogène. La stratégie de couplage ADN tétraèdre facilite l'administration ciblée de Dox, améliore l'efficacité anticancéreuse de Dox sur les cellules cancéreuses du côlon et fournit une inspiration et une idée prometteuses pour la conception de médicaments.